猪前体脂肪细胞与肌卫星细胞体外联合培养

摘要

利用差速贴壁法分别纯化前体脂肪细胞与肌卫星细胞,按1∶10的浓度比接种混合培养.以单独两类细胞培养作对照,采用油红O染色和Desmin免疫组化染色鉴定,通过形态学观察和MTT比色绘制生长曲线研究细胞生长规律.结果表明,Desmin免疫组化染色观察肌细胞阳性率达97%以上,油红O染色计数诱导分化细胞比率大于60%;形态学观察发现,联合培养细胞接触汇合前形态呈梭形,接触后不规则重叠交织生长;充脂细胞呈现较晚,且数量稀少;HE染色可见多核细胞融合成肌管样结构;测定2～9 d细胞生长曲线显示,联合细胞组增殖比率大于对照组,经历2～3 d潜伏期、3～7 d指数生长期后,并未与对照组同步进入平台期,而呈持续缓慢上升趋势.实验初步实现了体外猪前体脂肪细胞与肌卫星细胞的直接联合培养,并显示其与对照组生长特性存在差异.