甘蓝型油菜及近缘种中异质型ACCase亚基accD编码基因的克隆及序列分析

摘要

采用RT-PCR方法,以甘蓝型油菜(Brassica napus)、甘蓝(B.oleracea)、芥菜型油菜(B.juncea)和白菜型油菜(B.rapa)的幼嫩叶片cDNA为模板对异质型乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)的β-CT亚基(羧基转移酶)的accD编码基因进行扩增,得到长度分别为1 470、1 470、1 464和1 464 bp的编码序列,分别可编码489、489、487和487个氨基酸的蛋白质.白菜型油菜、芥菜型油菜和甘蓝的accD序列Genbank登录号分别为EU410075、EU410076和EU410077.序列分析表明,来自4个油菜近缘种的accD基因高度同源,编码的蛋白质都具有相似的锌指结构和C-末端5个相同的基元,其中基元Ⅰ(GSMGSVVG)和基元Ⅱ(PLIIVCASGGARMQE)在所有植物及大肠杆菌(Escherichia coli)的β-CT亚基中普遍存在.Southern杂交显示该基因在甘蓝型油菜及其近缘种的基因组中呈单拷贝.