植物青枯菌aac基因突变株的构建及其致病性的测定

摘要

根据青枯菌(Ralstonia solanacearum)与群体猝灭相关aac基因序列设计PCR引物,扩增并克隆了aac基因,将庆大霉素基因(GMr)插入aac基因内部,亚克隆至自杀质粒pDSl32中,构建了aac基因重组自杀质粒pDS-aa-Gm.将自杀质粒电转化至青枯菌GMI1000菌株中,通过体内同源重组,置换其野生型的8ac基因.通过三步筛选法和PCR扩增鉴定,筛选获得了具有庆大霉素抗性的青枯菌aac基因突变株(GMl1000-m).土壤接种番茄青枯菌结果显示,突变株GMI1000-m的致病性较野生型GMl1000明显下降.证明aac基因在青枯菌致病过程中具有重要作用.