大肠杆菌表达的乙型肝炎表面抗原124aa分子的纯化和免疫学鉴定

摘要

目的探索大肠杆菌表达的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)124aa分子作为疫苗成分应用的可能性. 方法以超声破碎法获取包涵体,用HisTrapTM试剂盒亲和层析纯化目的蛋白,加入聚乙二醇(PEG4000)以提高变性蛋白的复性效率;以抗HBsAg a抗原决定簇单克隆抗体(McAb)和抗HBsAg多克隆抗体(PcAb)作为包被抗体,采用夹心 ELI SA法分析其抗原性;以纯化产物免疫BALB/c小鼠,RIA法测定小鼠血清中抗HB s抗体.结果通过HisTrapTM试剂盒亲和层析纯化的HBsAg124aa分子经反相高效液相色谱(RP-HPLC)分析,纯度达95 %以上 ;经复性后的蛋白具有抗原性和免疫原性.结论 HBsAg124aa 分子在大肠杆菌中的成功表达,为探索新的乙型肝炎疫苗成分提供了重要线索.