荜茇酰胺通过激活p38/Caspase-3/GSDME通路诱导胃癌细胞焦亡

摘要

目的探讨荜茇酰胺(PL)对胃癌细胞焦亡的作用及其可能机制。方法用DMSO(对照组)和不同浓度PL 0.5、1、2.5、5、10、20、30μmol/L处理胃癌细胞株AGS,或用Caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO 1μmol/L、p38抑制剂达马莫德(BIRB 796)20μmol/L、siRNA-加斯德明E(GSDME)预孵育细胞后加入PL 30μmol/L。采用MTT法检测细胞增殖,乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性法检测LDH释放量,倒置显微镜下观察细胞焦亡形态学变化,Western blot法检测GSDME、GSDME-N端、裂解Caspase-3(Cle-Caspase-3)、磷酸化p38(p-p38)和p38蛋白表达。结果与对照组相比,PL呈浓度依赖性地抑制细胞增殖,促进LDH释放,下调GSDME蛋白表达,上调GSDME-N端、Cle-Caspase-3和p-p38蛋白表达(P<0.05),并诱导细胞发生焦亡。Ac-DEVD-CHO或siRNA-GSDME预孵育后,PL诱导的细胞焦亡现象被逆转。BIRB 796预孵育后,PL诱导的Cle-Caspase-3和GSDME-N端蛋白表达降低(P<0.05)。结论PL可能通过激活p38/Caspase-3/GSDME通路诱导胃癌细胞焦亡。