甲型流感病毒SwH1N1血凝素蛋白HA1真核表达载体的构建与表达

摘要

目的 构建甲型流感病毒SwH1N1血凝素蛋白(HA1)的真核表达载体,并表达其编码蛋白HA1.方法 利用RT-PCR技术扩增HA1基因,克隆至pMD18-T Simple Vector中构建pMD18-T-HA1质粒.双酶切pMD18-T-HA1与PXJ40后回收并连接回收片段,构建PXJ40-HA1真核表达载体,鉴定后转染293T细胞,用免疫印迹法(western-bolt)鉴定重组HA1蛋白的表达.结果 实验成功构建HA1基因的真核表达载体,并在真核细胞中表达出分子量为40 kD的重组蛋白.结论 成功构建的甲型流感病毒SwH1N1 HA1基因的真核表达载体,可为后期的流感快速检测及基因工程疫苗的制备奠定良好的基础.