16S rRNA甲基化酶RmtB耐药重组菌的构建及其稳定性研究

摘要

为构建16S rRNA甲基化酶RmtB重组菌并测定其稳定性,应用分子克隆技术构建16S rRNA甲基化酶RmtB重组菌,采用菌落PCR、双酶切、药敏试验及序列分析等方法鉴定重组质粒,测定重组菌的生长曲线及传代后的最低抑菌浓度(MICs)以确定重组菌的稳定性.结果表明,构建了16S rRNA甲基化酶RmtB重组菌pRmtB1、pRmtB2、pRmtB4.重组菌对阿米卡星、庆大霉素高度耐药.在没有抗生素选择压力下传代3次后,3株重组菌的生长曲线基本相似,但只有pRmtB1维持了对庆大霉素和阿米卡星的高度耐药性.由此可知,重组菌pRmtB1较稳定,可作为16S rRNA甲基化酶耐药抑制剂筛选模型.