16S rRNA甲基化酶在氨基糖苷类抗生素高度耐药革兰阴性菌中分布的研究

摘要

目的:2003年来，革兰阴性菌中相继发现6种编码16S rRNA甲基化酶的基因，该基因介导对大部分氨基糖苷类抗生素高度耐药。这些甲基化酶的分布在不同菌种和不同地区有所不同。方法:收集2007年上海1所三级甲等医院对阿米卡星和庆大霉素耐药的革兰阴性菌。药敏试验采用纸片法。通过PCR检测6种甲基化酶基因，分别为armA,rmtA，rmtB，rmtcC，rmtD和npmA。采用ERIC-PCR对16S rRNA甲基化酶基因阳性的菌株做同源性分析。结果:741株革兰阴性菌中，229株(30.9%)对阿米卡星和庆大霉素耐药，其中217株对这2种氨基糖苷类抗生素呈高度耐药(纸片药敏法抑菌圈直径=6mm)，12株呈低水平耐药(阿米卡星抑菌圈为7～12 mm，庆大霉素抑菌圈为7～14 mm)。217株高度耐药菌中包括：66株肺炎克雷伯菌，60株鲍曼不动杆菌，44株铜绿假单胞菌，12株粘滞沙雷菌，11株奇异变形杆菌，10株大肠埃希菌和14株其他细菌。在这些高度耐药菌中，199(91.7%)株被检出含有16SrRNA甲基化酶基因，134株为armA(61.8%)，65株为rmtB(30%)。未检测到rmtA，rmtC，rmtD和npmA基因。18株高度耐药菌和12株低水平耐药菌中，未检测到甲基化酶基因。根据ERIC-PCR结果，12株大肠埃希菌分为6个不同克隆，65株肺炎克雷伯菌分11个克隆，24株铜绿假单胞菌分为8个克隆，57株鲍曼不动杆菌分7个克隆，2株摩根摩根菌分2个克隆，4株弗劳地柠檬酸杆菌和2株产酸克雷伯菌分别为1个克隆。结论:上海地区革兰阴性菌对氨基糖苷类抗生素耐药率较高。在高度耐药的菌株中，大部分可以检测到armA和rmtB基因。该类基因可以水平和垂直传播。