鸭病毒性肝炎病毒细胞培养技术的研究

摘要

采用"带毒-同步培养"新技术和特殊培养条件,延长病毒吸附时间(120分钟),提高犊牛血清灭能温度(65℃30分钟),降低犊牛血清用量(1%),在维持液中添加100mM NaCl等,成功地将鸭病毒性肝炎标准Ⅰ型病毒ATCC株适应于鸡胚成纤维细胞(CEF).连续传代至第6代时出现CPE,第9代时,CPE呈现规律性,接毒后46小时CPE达90%,其特征是细胞变圆,凝固性坏死,脱落.经病毒血清中和试验、DHV单抗中和试验、负染电镜、免疫电镜和超薄切片等方法证实我们采用的特殊培养方法和条件可成功地将DHV适应于CEF.