鸭疫里默氏杆菌与鸭病毒性肝炎病毒的分离鉴定与卵黄抗体的制备研究

摘要

本研究以鸭疫里默氏杆菌和鸭病毒性肝炎病毒为研究对象，首先从郑州郊区某鸭场采集病鸭，分离得到鸭疫里默氏杆菌，经生化鉴定、血清型鉴定、RA的药物敏感性试验与病原性试验，证明分离得到的为Ⅰ型RA菌株。将此分离株分别在血清肉汤与鸭胚上进行增菌培养，结果表明其在鸭胚上的增菌培养效果明显优于血清肉汤。将所得菌液经0.5％福尔马林灭活后，加入氢氧化铝胶作为佐剂，安检合格后保存。 又从郑州郊区某鸭场采集病鸭，分离得到鸭病毒性肝炎病毒。并通过血清中和试验、病毒的血凝性测定、动物回归试验等证明分离到的确实为Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒，其EID50为10-4.81。 将鸭疫里默氏杆菌和鸭病毒性肝炎病毒分别灭活后混合制成油乳佐剂，经过无菌检验、安全检验后对50只健康高产蛋鸡进行免疫，经鸡胸和腿部皮下及肌肉多位点注射，于第10d和20d分别接种2ml和4ml。免疫后每日收集鸡蛋，编号后于4℃保存。采用双向免疫扩散和免疫电泳测定免疫后鸡卵黄中鸭疫里默氏杆菌和鸭病毒性肝炎病毒抗体含量及其效价的变化，结果表明，母鸡初次免疫后第10天卵黄中即可测出相应抗体，第20天（第二次免疫）后抗体效价明显提高。取第二次免疫后第10天到第40天的卵黄，进行IgY的提取。取卵黄粗提物行免疫电泳，扩散进行抗体鉴定，其可与制备的DHV、RA抗原出现明显的沉淀反应。并对提取得到的IgY进行蛋白含量测定，其最终浓度为2.258mg/mL。

目录

文摘

英文文摘

声明

致谢

文献综述

引言

试验一 鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定与增菌培养研究

1 材料与方法

2 结果

3 结论与讨论

试验二 鸭病毒性肝炎病毒的分离与鉴定

1 材料与方法

2 结果

3 结论与讨论

试验三 鸭疫里默氏杆菌与鸭病毒性肝炎病毒高免卵黄抗体的制备

1 材料与方法

2 结果

3 结论与讨论

参考文献：