猪传染性胸膜肺炎放线杆菌LAMP诊断方法的建立及耐药性调查

摘要

为建立快速诊断猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)的方法和耐药情况,根据GenBank中的APP apxIVA基因,设计合成2对引物,通过环介导等温扩增技术(LAMP)扩增条件的优化,建立了APP LAMP诊断方法,同时对分离到的APP进行耐药性分析.结果显示,建立的LAMP诊断方法最低核酸检测量为2 pg/μL,对猪源大肠杆菌、猪源沙门氏菌、猪源支原体、副猪嗜血杆菌、猪源多杀性巴氏杆菌的扩增结果均为阴性,扩增反应30 min内完成,结果肉眼可见.分离得到的31株APP,耐药性较强.结果表明,建立的方法可满足基层现场快速检测需要,对分离得到的31株APP耐药性分析表明,APP耐药性较严重.