蛋白酶产生菌的筛选、鉴定及酶学性质研究

摘要

采用干酪素平板透明圈法从垃圾附近的土壤中分离得到1株产蛋白酶的优良菌株,通过测定其16S rDNA基因序列,鉴定该菌为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa).以酪蛋白为底物对该菌所产蛋白酶粗酶液进行了酶学性质研究,结果表明,该酶最适反应pH为8.5,为碱性蛋白酶;在pH 6.0～9.0的缓冲液中于4℃放置12h后仍有90％以上的酶活性,说明该酶在中性和碱性条件下非常稳定.该酶最适反应温度为55℃,在70 ℃和80℃处理30 min后仍分别保有68％和45％的残余酶活性,从而表明该酶具有较好的热稳定性.Mg2+和Fe2+对该酶活性几乎没有影响,K+和Mn2+对该酶活性有轻微的抑制作用,ED-TA对该酶活性有明显的抑制作用;Cu2+对该酶活性也有26％的抑制作用,只有Ca2+对该酶活性有10％左右的促进作用.