壳聚糖修饰后的纳米羟基磷灰石作为BMP-2输送载体转染细胞的研究

摘要

目的:研究羟基磷灰石( hydroxyapatite,HA)纳米粒载体经壳聚糖(chitosan,CS)修饰后介导骨形态发生蛋白2(Bone morphogenetic protein2,BMP2)基因转染成骨细胞后的表达及表达产物对成骨细胞的影响.方法:用壳聚糖对羟基磷灰石纳米粒进行表面修饰；复苏成骨细胞株并进行传代培养,采用HA-CS纳米粒载体转染技术,将BMP-2目的基因导入成骨细胞,RT- PCR法鉴定BMP-2的整合和表达；检测细胞中碱性磷酸酶(alkaline phoaphatase,ALP)及骨钙素(osteocalcin,OCN)活性.结果:RT-PCR结果显示BMP-2基因在成骨细胞中稳定表达,而且表达产物增加了成骨细胞中碱性磷酸酶及骨钙素活性.结论:HA-CS纳米粒作为输送载体可以安全地将目的基因BMP-2导入成骨细胞中并稳定表达,同时增加了成骨细胞的生物学活性.