TvNHX1基因对矮牵牛的遗传转化

摘要

为获得耐盐碱特性的矮牵牛新种质,提高其在广大盐碱地区的适应性,以矮牵牛品种梦幻兰和利宝紫为试材,简要介绍了TvNHX1基因的植物表达载体构建及用农杆菌介导法将TvNHX1基因转化矮牵牛的初步结果,并分析了6-BA和NAA组合对矮牵牛叶片分化的影响.结果表明：对PCR筛选得到的阳性菌落摇菌、提取质粒后进行BamHI/SacI双酶切鉴定,在1640bp左右得到了单一条带,与预期一致.证明pBI121-TvNHX1构建成功；在不同浓度激素组合的培养基中,梦幻兰的分化率都高于利宝紫,梦幻兰品种在6-BA为2.0mg·L-1、NAA为0.2mg·L-1时分化率达90.69%；以梦幻兰品种的叶片为外植体诱导生根,得到12株在筛选培养基上正常生根的矮牵牛苗,以TvNHX1基因特异引物 WFF和JWR1对获得的Kan抗性植株和非转基因对照进行PCR检测,12个抗性植株中7株扩增出特异的条带,说明TvNHX1基因已转入矮牵牛.