差异表达的miR-20a对胃癌细胞恶性转化的影响及其机制研究

摘要

目的 探讨微小分子非编码RNA-20a(miR-20a)在胃癌中的表达及其对胃癌细胞恶性转化的影响,并对其作用机制进行研究.方法 选取2014年9月至2017年9月经江苏大学附属昆山医院病理确诊的45例患者的新鲜胃癌及癌旁组织标本,提取总RNA,qRT-PCR检测胃癌及癌旁组织中miR-20a的表达,脂质体转染寡核苷酸片段NC-inhibitor及miR-20a-inhibitor至MGC-803细胞,qRT-PCR检测转染后MGC-803细胞中miR-20a的表达水平,平板克隆实验和Transwell迁移实验分别检测转染miR-20a-inhibitor后MGC-803细胞增殖能力和迁移能力的改变,Western blot法检测转染前后MGC-803细胞AKT通路活性的改变及对上皮间质转化(EMT)蛋白表达情况的影响.结果 癌组织中miR-20a/U6的表达水平为1.12±0.10,显著高于癌旁组织的0.30±0.04,差异具有显著统计学意义(P<0.01);miR-20a-inhibitor转染组miR-20a/U6的表达水平为0.65±0.04,明显低于NC-inhibitor转染组的1.01±0.14,差异具有显著统计学意义(P<0.01);miR-20a-inhibitor转染组克隆细胞数量为(70±3)个,明显低于NC-inhibitor转染组的(110±4)个,差异有统计学意义(P<0.05);miR-20a-inhibitor转染组Transwell细胞迁移数量为(35±4)个,明显低于NC-inhibitor转染组的(53±6)个,差异有统计学意义(P<0.05);与miR-20a-inhibitor转染组比较,NC-inhibitor组AKT通路活化减弱,同时上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)表达减弱,神经钙粘蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达增强.结论 与癌旁组织相比,癌组织中miR-20a的表达水平显著增高,miR-20a通过促进胃癌细胞增殖和迁移途径引起胃癌细胞恶性转化.