应用DiI标记的氧化低密度脂蛋白观察人单核细胞源性的树突状细胞成熟的研究

摘要

目的 探讨氧化修饰低密度脂蛋白(oxLDL)和低密度脂蛋白(LDL)对人单核细胞源的树突状细胞(DCs)免疫功能的影响.方法 从人外周血清中离心提取低密度脂蛋白,经氧化后,分别用DiI荧光标记.将人外周血分离的单核细胞加入包含rhGM-CSF(20 ng/ml)和rhIL-4(20 ng/ml)的培养基中培养,使其分化为DCs.以PBS作阴性对照,分别与50 μg/ml的标记好的oxLDL和LDL混合培养48 h后,动态观察DCs成熟过程中的形态学变化,流式细胞术检测DCs成熟表型(CDla,CD80,CD86,HLA-DR),混合T淋巴细胞反应检测DCs对淋巴细胞增殖的影响.结果 使用DiI标记的方法良好地显示了DCs摄取OxLDL的形态学变化.OxLDL可促进DCs成熟表型CD86,CDla的表达,T细胞增殖作用明显增强(P＜0.05).结论 DiI是适合DCs形态学研究的良好的荧光标记物.OxLDL可促进DCs成熟,并增加DCs的免疫活性.