氧化修饰低密度脂蛋白促进人单核细胞源树突状细胞的成熟及活化

摘要

目的探讨氧化修饰低密度脂蛋白(oxidized-low density lipoprotein,oxLDL)和低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)对人单核细胞源的树突状细胞(monocyte derived dendritic cells,MDCs)免疫功能的影响.方法采用免疫磁珠法分离人外周血CD14+单核细胞,经含rhGM-CSF(100ng/mL)和rhIL-4(20ng/mL)的Cell-gro培养,使其分化为MDCs.分别以PBS和LPS(500μg/mL)作阴性和阳性(成熟)对照,观察经50μg/mL的oxLDL和LDL干预48 h后,流式细胞术检测MDCs表型(CD1a、CD40、CD86、HLA-DR),混合T淋巴细胞反应检测MDCs对淋巴细胞增殖的影响,FITC-Dextran检测MDCs吞噬功能,ELISA检测细胞培养上清细胞因子(IL-12、IL-10和TNF-α)浓度.结果与PBS相比,50 μg/mL oxLDL干预的MDCs,不但可明显上调共刺激分子CD86的高表达,而且反映MDCs成熟程度的CD1a也表达增强,与此同时经oxLDL处理的MDCs吞噬作用却明显减弱,进一步的混合T淋巴细胞反应显示经过oxLDL刺激的MDCs促T细胞增殖作用明显增强(P＜0.05);此外,oxLDL可明显促进MDC分泌细胞因子TNF-α、IL-10和IL-12(P＜0.05),但明显弱于LPS组,而LDL无此作用.结论oxLDL在促进DCs成熟的同时,DCs激活T淋巴细胞的能力也明显增强.此外oxLDL还可直接通过促进DCs本身释放一些炎症因子,加速和放大炎症免疫反应.这可能是DCs参与动脉粥样硬化炎症免疫反应发生的重要机制之一.