W-7对NMDA诱导的体外培养神经元损伤的神经保护作用及机制

摘要

目的 观察钙调蛋白抑制剂W-7对NMDA诱导的体外培养的皮质神经元损伤的保护作用,并探讨药物作用机制.方法 取原代培养7 d的大鼠皮质神经元随机分为5组:(1)对照组:仅用DMEM/F12完全培养基.(2)NMDA组:去除正常神经元培养液,加入NMDA 50 μmol/L.(3)保护组:W-7低中高剂量,分别为25、50、100 μmol/L,加入NMDA 50 μmol/L.MTT法检测细胞存活力;试剂盒检测培养上清液中乳酸脱氢酶含量;用免疫细胞化学染色法检测皮质神经元内p38MAPK蛋白的表达.结果 (1)同对照组比较,NMDA组神经细胞存活力降低(P<0.01),W-7预处理组增加(P<0.05).(2)NMDA组培养上清液中LDH含量高于对照组,差异有显著性(P<0.01);W-7干预组LDH含量低于NMDA组,差异有显著性(P<0.05);(3)同对照组比较,NMDA组NF-κB蛋白表达增加(P<0.01);同NMDA组比较,W-7干预组表达减少,差异有显著性(P<0.05,P<0.01).结论 W-7可减轻NMDA对培养的皮质神经元的损伤,对皮质神经元具有保护作用.其作用是通过抑制NF-κB的蛋白表达实现的.