丙泊酚预处理对SK-N-SH神经母细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

摘要

目的 探讨不同浓度的丙泊酚预处理对SK-N-SH神经母细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及对神经生长因子(NGF)表达的影响.方法 取离体培养的SK-N-SH细胞,随机分成7组:对照组,不作任何处理;氯化钴(CoCl2)组:加入300 μmol/L CoCl2处理1 h,然后更换正常的培养基培养24 h,之后更换无血清的培养基培养;脂肪乳剂组:加入10%脂肪乳剂90 μL预处理1 h 后加入300 μmol/L CoCl2;丙泊酚组:培养孔中加入10、20、50、100 μmol/L浓度的丙泊酚预处理1 h 后,同 CoCl2组处理.MTT法测定细胞增殖,流式细胞技术测定细胞的凋亡.为进一步研究不同浓度丙泊酚对NGF表达的影响,将SK-N-SH细胞分为6组,分别为对照组、CoCl2组和10、20、50、100 μmol/L浓度的丙泊酚,用RT-PCR 和Western blot 分别检测NGF mRNA和NGF蛋白表达.为探讨丙泊酚对NGF的作用机制,将细胞随机分为6组:对照组、CoCl2组、50 μmol/L丙泊酚组、10 μmol/L PD98059组、30 μmol/L SP600125组和30 μmol/L SB202190组.结果 脂肪乳剂组细胞活性与CoCl2组比较,差异无统计学意义(P>0.05),50 μmol/L丙泊酚预处理可以明显增加SK-N-SH细胞的增殖能力,减少凋亡(P<0.01).10、20、100 μmol/L浓度的丙泊酚与CoCl2组比较差异无统计学意义(P>0.05).50 μmol/L丙泊酚预处理上调NGF mRNA 和 NGF蛋白的表达,而这些调节作用可被JNK 抑制剂SP600125抑制(P<0.01),PD98059和SB202190对NGF的表达与CoCl2组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 50 μmol/L丙泊酚预处理对缺氧/复氧后的SK-N-SH细胞有保护作用,NGF在丙泊酚的预处理中起到重要的作用.