白假丝酵母菌吡咯类药物相关耐药基因的突变和表达

摘要

目的：了解白假丝酵母菌吡咯类药物相关耐药基因的突变和表达情况。方法采用裂解法提取白假丝酵母菌 DNA，扩增 ERG11基因后测序，选取3种吡咯类药物（氟康唑、酮康唑、咪康唑）均耐药的全耐药菌株DNA 片段进行 TA 克隆；利用荧光定量 PCR 技术对 CDR1、CDR2、MDR1基因表达的 mRNA 进行相对定量，比较耐药株与敏感株表达水平的差异。结果37株耐吡咯类白假丝酵母菌中，ERG11存在41个碱基突变位点，其中20个同义突变，21个错义突变，发现新变异：N12I、Y13F、S16F、V36F、V51L、G129E、T123I、E194K、K344N、E517G、V234A；CDR1基因2－ΔΔCt值敏感株为1．09±0．27，耐药株为1．46±0．24，两者比较差异有统计学意义（P ＜0．05）；敏感株与耐药株间 CDR2和 MDR1基因的表达水平比较差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论白假丝酵母菌耐药机制较为复杂，可能与 ERG11某些位点突变导致的氨基酸变异和 CDR1高表达有关，CDR2和 MDR1表达与耐药关系有待进一步研究。