富血小板纤维蛋白提取液对牙龈成纤维细胞增殖活性的影响

摘要

目的 研究富血小板纤维蛋白提取液(platelet-rich fibrin extract,PRFe)及其释放的血小板衍生生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)对牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)增殖活性的影响,为其应用于辅助促进牙龈软组织增量提供实验依据.方法 通过组织块培养法分离培养牙龈成纤维细胞,将收集的富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)转化为PRFe,电镜观察PRF三维结构并通过ELISA定量测定PRF中PDGF含量,并将PRFe配比为2.5％PRFe、5％PRFe、7.5％PRFe、10％PRFe、12.5％PRFe、15％PRFe,通过CCK8法检测不同浓度PRFe对牙龈成纤维细胞增殖活性的影响,确定最佳PRFe浓度后,流式细胞周期实验检测PRFe对细胞增殖周期的影响,并通过中和其释放的PDGF,观察PDGF对牙龈成纤维细胞增殖活性的影响.结果 PRF为三维网状结构,其间含有大量的生长因子,其中PDGF释放在第7天达到峰值;不同浓度PRFe对HGFs增殖活性结果显示,HGFs对PRFe呈浓度依赖性,但在5％PRFe浓度时效果最佳(P<0.05),其后浓度增加对HGFs增殖影响差异无统计学差异(P>0.05);流式细胞周期实验结果表明,5％PRFe可以刺激牙龈成纤维细胞S期分裂增殖;而PDGF中和实验结果表明,中和部分PDGF对牙龈成纤维细胞的增殖呈抑制作用.结论 5％浓度的PRFe体外促进牙龈成纤维细胞的效果最佳,PRF所释放的PDGF在促进牙龈成纤维细胞的增殖中起着重要作用.