荔枝果肉总RNA的提取及实时定量PCR分析

摘要

荔枝果肉因含糖量高、水分大和含较高活性的氧化酶而难以提取高质量的总RNA.以妃子笑荔枝不同发育期果肉为试材,经过多种提取方法比较和改进,发现市售RNA提取试剂盒改进提取步骤后均可快速得到质量较高的总RNA,果肉总RNA完整性好、质量高,平均浓度都在20 μg/g以上,符合进一步分子生物学试验的要求.以反转录后得到的cDNA为模板,进一步的实时定量PCR反应表明以未纯化的RNA反转录的cDNA为模板没有信号,而经纯化后即可得到有规律的基因表达.