回阳生肌膏对人来源微血管内皮细胞的干预作用

摘要

cqvip:目的研究回阳生肌膏对人来源微血管内皮细胞体外凋亡和迁移的影响及其可能存在的机制。方法细胞实验分为空白组、模型组、实验组和阳性对照组,空白组与模型组不予干预,实验组予回阳生肌膏,阳性对照组予龙珠软膏,均作用48小时。采用MTT法筛选药物无毒浓度;流式细胞术观察细胞凋亡情况;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞上清液中基质金属蛋白酶1(matrix metallopeptidase 1,MMP1)、基质金属蛋白酶9(matrix metallopeptidase 9,MMP9)、基质金属蛋白酶抑制剂1(tissue inhibitors of matrix metalloproteinase 1,TIMP1)、基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP2)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)含量;细胞迁移实验检测细胞迁移能力;蛋白质印迹法检测血管内皮细胞生长因子受体2(VEGF receptor 2,VEGFR2)蛋白的表达。结果确定了实验组予50μg/mL回阳生肌膏,对照组予25μg/mL龙珠软膏为后续试验浓度,作用48小时后,与模型组相比,回阳生肌膏可有效抑制内皮细胞的凋亡(P<0.05),而龙珠软膏能显著抑制内皮细胞凋亡(P<0.01);与模型组相比,回阳生肌膏、龙珠软膏在体外均能显著下调糖尿病足内皮细胞MMP9、TIMP1的分泌(P<0.01),显著提高VEGF的含量(P<0.01),对MMP1、TIMP2的表达也有下调趋势;细胞迁移试验结果显示,回阳生肌膏可增多人来源微血管内皮细胞的迁移数(P<0.05),龙珠软膏能显著增多细胞迁移数(P<0.01);蛋白质印迹法结果显示,回阳生肌膏、龙珠软膏均促进了糖尿病足创面内皮细胞VEGFR2蛋白的表达(P<0.05)。结论回阳生肌膏可抑制糖尿病足创面内皮细胞凋亡,促进糖尿病足创面内皮细胞迁移增殖,其机制可能与其调控基质金属蛋白酶类及抑制酶类,促进VEGF、VEGFR2的表达有关。