玉米谷氨酰胺合成酶c—DNA导入根癌农杆菌15955

摘要

用粘端连接法将构建于Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＦＤＢ２１３菌檄中的玉米谷氨酰胺合成酶（ＭＧＳ）ｃ－ＤＮＡ亚克隆于由农力质粒改造的ＰＢＩ１２１载体中。测定的７２个转化菌中７株（９．２％）插入ＭＧＳｃ－ＤＮＡ片段。亚克隆后的质粒ＤＮＡ用ＨｉｎｄⅢ和ＢｓｔｘＩ酶解可确定其ｃ－ＤＮＡ片段的插入方向。结果显示：Ｐ９、Ｐ１５、Ｐ１６与Ｐ１７为正向插入，Ｐ２为反向插入的菌株。Ｐ６质粒ＤＮＡ进一步用直接基