RNAi沉默中期因子基因表达对结肠癌细胞凋亡和化疗敏感性的影响

摘要

目的 观察中期因子(midkine,MK)基因小干扰RNA(smatl interfeing RNA,siRNA)对结肠癌细胞增殖、凋亡和化疔药物敏感性的影响.方法 设计合成MK siRNA,转染结肠癌SW620细胞.细胞分5组:空白对照组,脂质体对照组和3.125 nmol/L、6.25 nmol/L、12.5 nmol/L的siRNA干预组.于不同时间收获细胞.分别以实时定量PCR和Western blot检测各组细胞MK的mRNA及蛋白表达,分别通过caspase-3和TUNEL检测结肠癌细胞凋亡,以啪法检测100/μg/L伊立替康(CPT-11)对各组肿瘤细胞的生长抑制率.结果 siRNA可有效抑制SW620结肠癌细胞MKmRNA和蛋白表达水平.结肠癌细胞caspase-3活性增高,呈浓度和时间依赖性TUNEL结果显示,凋亡细胞明显增多,呈时间和浓度依赖性.MTT结果显示:CPT-11对各组细胞均有抑制作用,以12.5 nmol/L的最为明显,而各对照组细胞无明显差异.结论 MK siRNA可诱导结肠癌细胞凋亡和增加化疗药物的敏感性.