基因工程菌1020耐热木聚糖酶的纯化与性质

摘要

通过热变性处理和Ni-NTA层析分离纯化基因工程菌1020耐热木聚糖酶.对热变性条件优化,70℃处理30min效果,纯化倍数4.9;利用木聚糖酶C端6个His标记对Ni-NTA琼脂糖凝胶的结合性,一步层析得到电泳纯的木聚糖酶.酶的最适反应温度为110℃,具有高度耐热性,在70℃保温8h,酶活基本不变,100℃保温5h后,酶活残余40%;在pH6.0～10.0范围内都有较高的酶活性和稳定性.低浓度的异丙醇对酶反应有促进作用,Hg2+对酶反应有强抑制作用.该酶对燕麦木聚糖的Km为0.55mg/ml,Vmax=14.26μmol/min·mg.