FTA滤膜用于PCR检测肉中的沙门氏菌

摘要

在采用浮选与溶剂萃取相结合方法的基础上,使用FTA滤膜从鲜肉中提取沙门氏菌的DNA,消除PCR反应的抑制因子.以沙门氏菌编码吸附和侵袭上皮细胞表面蚩白的invA基因为靶基因,经过PCR扩增得到376bp的产物,经过DNA测序证实该产物为目的扩增产物.使用FTA滤膜处理样品,再通过PCR方法检测沙门氏菌,猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉匀浆液的检出限均为7×101CFU/ml,可在6h内完成对肉中沙门氏菌的检测,比目前普遍采用的先增菌再进行PCR检测的方法缩短了12～24h.实际检测了72份样品,同时与GB/T 4789.4-2003方法做比较,本方法的检出率为27.8%,检出时间为6h;GB/T 4789.4-2003方法检出率为22.2%,检出时间为5d.结果表明:FTA滤膜用于PCR检测肉中沙门氏菌检出率高、耗时短.使用FTA滤膜法制备模板DNA,为食品中的致病菌快速检测构建了一个技术平台.