肉中4种致病菌的PCR快速检测方法的建立

摘要

目的:建立一种能同时检测肉中金黄色葡萄球菌、志贺氏菌、沙门氏菌和单核增生李斯特菌的多重PCR检测方法.方法:根据金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶基因(nuc)、沙门氏菌的侵袭蛋白基因(invA)、志贺氏菌的侵袭性质粒抗原基因(ipaH)和单核细胞增生性李斯特菌的内化素基因(inlA)设计引物,通过优化好的反应体系进行多重聚合酶链反应(PCR)扩增目的基因.结果:特异性实验结果表明4种菌均能在相应位置扩增出特异性条带.对污染4种菌的猪肉进行检测,确定出金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的检出限是10(2)CFU/mL,志贺氏菌和单核增生李斯特菌的检出限是10(1)CFU/mL.结论:本实验建立的多重PCR方法比传统细菌检测方法更特异、快速、灵敏,适用于肉中金黄色葡萄球菌、志贺氏菌、沙门菌和单核增生李斯特菌的快速检测.