荧光聚合酶链式反应检测白粿干模拟转基因样品前处理优化

摘要

为提高米制品中转基因成分实时荧光聚合酶链式反应检测的灵敏度与检出率,应用模拟转基因白粿干样品,对影响检测结果的主要因素,包括样品颗粒细度、DNA提取过程中样品在十六烷基三甲基溴化铵裂解缓冲液中温育时间等因素进行优化.结果表明:提取的DNA量在样品颗粒细度与十六烷基三甲基溴化铵缓冲液温育时间的9种处理组合间都有极显著差异,其中最优条件为样品颗粒细度＞100目、十六烷基三甲基溴化铵缓冲液温育时间＞8h(过夜).采用最优前处理组合,样品的主要转基因成分检出限从公认的转基因含量0.01％ (m/m)降到0.001％ (m/m),检测灵敏度提高10倍,有效提高了米制品转基因成分检测结果的准确性.