吐温-80对钝齿棒杆菌产L-赖氨酸的影响

摘要

对吐温-80提高L-赖氨酸产量的分子机制进行探究.以钝齿棒杆菌MT-M4 △proB为出发菌株,在菌株生长至对数初期36 h时,添加5 mg/mL吐温-80进行摇瓶发酵,通过反转录实时荧光定量聚合酶链式反应(reverse translate real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)监控相关基因的转录水平、胞内的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate reduced form,NADPH)水平及α-酮戊二酸脱氢酶复合物(α-oxoglutarate dehydrogenase complex,ODHC)的活力.摇瓶发酵结果表明,添加吐温-80使L-赖氨酸产量提高了215％;RT-qPCR结果表明,编码ODHC的基因odhA、sucB和lpdA、参与ODHC调控的基因pknG、dtsR和ppp以及合成NADPH的磷酸戊糖途径基因zwf的转录水平均发生了变化,其中odhA、sucB、lpdA、pknG及dtsR1基因分别发生了上调,PPP基因下调,相应ODHC活力提高了32.9％;zwf基因上调了17.6倍,相应胞内NADPH水平提高了137％.因此,在对数生长初期36 h添加吐温-80具有双重功效,既提高了ODHC的表达又使NADPH积累,从而诱导L-赖氨酸的高产.