分散固相萃取结合UPLC-MS/MS测定不同人参加工品中46种皂苷类化合物

摘要

运用基质分散固相萃取净化,建立一种同时测定人参不同加工品中46种皂苷类化合物的超高效液相色谱-质谱分析方法。样品经体积分数80%甲醇溶液超声提取,通过N-丙基乙二胺(primary secondary amine,PSA)分散固相萃取净化后,采用KINETEX XB-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.6μm)分离,以0.1%甲酸溶液(A)和乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,采用负离子多反应监测模式分析和外标法定量。结果表明,46种皂苷类化合物在35 min内完成检测,在0.02~50μg/mL质量浓度范围内有较好的线性关系,所对应的相关系数(R2)均大于0.99,方法检出限为0.4~3.2 mg/kg,定量限为1.4~10.5 mg/kg,在低、中、高3个添加水平下的平均回收率为80.5%~111.6%,相对标准偏差(relative standard deviations,RSD)为1.3%~6.8%。方法日内和日间精密度的RSD分别为0.5%~4.5%(n=6)和1.1%~6.6%(n=6),重复性的RSD在1.5%~7.3%(n=6)之间,24 h内样品稳定性的RSD在0.9%~5.8%(n=6)之间。方法优化了分散固相萃取剂的种类和用量,并考察分散固相萃取净化前后对基质效应的影响,结果表明,样品前处理通过PSA分散固相萃取净化,有效降低了基质效应,且操作简便、高效、节约成本。将该方法用于3种不同人参加工产品生晒参、红参和黑参样品中46种皂苷类化合物的分析测定,结果发现红参和黑参经过蒸制加工处理后,部分原有的皂苷发生了转化,产生了稀有皂苷,且黑参中产生的稀有皂苷含量远高于红参。该方法准确可靠、快速、易操作,杂质干扰小,适合批量人参加工品中46种皂苷类化合物的同时定量分析。