假单胞菌H3壳聚糖酶的纯化及部分酶学性质

摘要

对Pseudomona sp.H3产生的壳聚糖酶粗酶液采用(NH4)2SO4盐析、Sephadex G-25脱盐、Sepharose Q-XL阴离子交换层析和Superdex G-75分子筛层析进行纯化,经SDS-PAGE鉴定为单蛋白带,分子质量约为33.8ku,酶反应最适温度为40℃,最适pH为5.0,降解壳聚糖(D.A.90.14%)Km值为3.59g/L,V max值为3.80mmol/(Lmin); Ba2+、K+、Co2+对该酶有激活作用,而Zn2+、Mn2+、Al3+、Cu2+则对酶有抑制作用;此外,该酶除了能降解壳聚糖以外,还具有CMCase活性.