杨桃多酚氧化酶的部分纯化及其特性研究

摘要

杨桃多酚氧化酶粗酶液经过DEAE-Toypearl 650M离子交换柱层析,Butyl-Toyopearl 650M疏水柱层析后,被纯化了21.6倍,回收率为45.2%.该酶能迅速地催化焦性没食子酸的酶促氧化反应,而对邻苯二酚、间苯二酚、对苯二酚和绿原酸则完全无催化活性.该酶对焦性没食子酸的Km值为7.92 mmol/L,其最适Ph为8.0,Ph稳定性范围在Ph 4.0-11.00,最适温度为60℃,热稳定性相对较高,在≥90℃加热30 min后仍残留约9%的酶活性.该酶的最佳抑制剂是抗坏血酸,其次是NaHSO_3和盐酸-L-半胱氨酸,Cu~(2+)、Zn~(2+)、Ca~(2+)等金属离子对该酶也有一定的抑制作用.