DA201-C大孔吸附树脂对乳铁蛋白抗菌肽的分离纯化

摘要

该研究以吸附量、树脂动态吸附和不同乙醇浓度(体积分数)梯度洗脱为考察指标,优化了DA201-C大孔树脂对超滤处理后的乳铁蛋白抗菌肽溶液(分子质量<3000 Da)分离纯化的工艺条件。静态吸附结果表明,当树脂吸附12 h后,吸附量为479.7 mg/g、吸附率为95.94%;对吸附饱和的树脂使用不同浓度的乙醇静态解吸,结果显示,75%(体积分数)乙醇解吸率达到95.35%。该研究还确定了最优吸附条件:NaCl浓度0.6 mol/L、上样流速1.5 mL/min和上样质量浓度20 mg/mL。以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抑菌率为指标,用不同浓度乙醇对乳铁蛋白抗菌肽进行梯度洗脱,结果表明,75%乙醇洗脱组分抑菌活性最强,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌率分别达到80.95%和74.42%,与未纯化前相比提高了12.2%左右。对不同洗脱组分的氨基酸分析,结果显示,抗菌肽的疏水性及正电荷性越大,抗菌活性越强。