β-1,4-内切木聚糖酶的分离纯化及其性质

摘要

通过硫酸铵分级盐析、DEAE-SephadexA50和DEAE－SepharoseCL-6B离子交换层析、FPLC等一系列分离纯化手段，从拟康氏木霉（TrichodermapseudokonigiRifai）固体培养基发酵抽提液中分离得到了Native－PAGE电泳纯的木聚糖酶，SDS-PAGE显示该酶为单肽链结构，分子量约为66kD。该酶的酶反应最适温度为55℃。酶反应的最适pH为4．5。该酶作用于山毛榉木聚糖（Beech－xylan）的Km为20mg/mL，Vmax为3．3μmol·min-1·mg-1。Hg2+、Cu2+对酶反应有较强的抑制作用，而Fe2+、Mn2+对该酶反应则有促进作用。