卵泡刺激素对上皮性卵巢癌细胞增殖凋亡的影响及其分子机制探讨

摘要

目的：从分子水平探索卵泡刺激素（FSH）是否通过磷酸酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）途径调节突变型p53蛋白（p53）的活性,从而调控上皮性卵巢癌细胞增殖、凋亡。方法：培养人卵巢癌细胞株SKOV3、3AO,分为对照组、FSH组、LY294002（PI3K抑制剂）组、FSH＋LY294002组,分别给予不同浓度的FSH和LY294002干预。四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测FSH对SKOV3、3AO细胞增殖的作用;流式细胞术（FCM）检测各组SKOV3、3AO细胞的凋亡率和细胞周期分布情况;Western blot法检测卵泡刺激素受体（FSHR）、蛋白激酶B（Akt1/2）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）及突变型p53蛋白的表达情况。结果：（1）与对照组相比,不同浓度FSH（10、20、40、80、160mIU/ml）作用于SKOV3、3AO细胞12~72h后,两种细胞的增殖率均升高（P〈0.05）。40mIU/ml的FSH作用于SKOV3 48h、3AO 24h时,两种细胞增殖率分别达到高峰。（2）FSH组SKOV3、3AO细胞的凋亡率均显著低于对照组（P〈0.05）;而FSH＋LY294002组细胞凋亡率显著高于FSH组（P〈0.05）。（3）两种细胞中,FSH组G0/G1期细胞数均显著小于对照组（P〈0.05）,S期细胞数均显著大于对照组（P〈0.05）;FSH＋LY294002组G0/G1期细胞数均明显大于FSH组（P〈0.05）,S期细胞数均明显小于FSH组（P〈0.05）。（4）SKOV3和3AO细胞均表达FSHR蛋白;与对照组比较,两种细胞各组FSHR、Akt1/2蛋白的表达水平无显著改变（P〉0.05）;但FSH可显著上调SKOV3、3AO细胞p-Akt及突变型p53蛋白的表达,与对照组比较差异显著（P〈0.05）,且LY294002可阻断FSH上调SKOV3、3AO细胞p-Akt蛋白的表达及突变型p53蛋白表达的作用,与FSH组比较,差异显著（P〈0.05）。结论：FSH可通过活化PI3K/Akt信号通路调节卵巢癌细胞株SKOV3、3AO突变型p53蛋白的表达,调控细胞周期进程,实现对卵巢癌细胞的促增殖和抗凋亡作用。