基于不同载体免疫原制备河豚毒素抗体的研究

摘要

目的比较牛血清白蛋白（BSA）和匙孔型血蓝蛋白（KLH）两种载体蛋白合成的河豚毒素人工抗原的免疫原性，并对其制备的抗体进行研究。方法用曼尼希法将半抗原河豚毒素（TTX）分别与大分子载体BSA和KLH偶联合成人工抗原TTX-BSA及TTX-KLH，免疫6～8周龄Balb／c雌性小鼠，制备多抗；以卵清白蛋白（OVA）为载体蛋白，同样用曼尼希法制备包被抗原TTX—OVA。TTX—KLH多抗血清同时采用TTX-OVA和TTX—BSA作包被抗原检测，抗血清经问接酶联免疫吸附法（iELISA）以及间接竞争酶联免疫吸附法icELISA）检测。结果经TTX-KLH免疫获得的多抗血清较TTX—BSA免疫获得的多抗血清特异性高。两种包被抗原的检测效价一致：均为1：64000，而以TTX—OVA为包被原的检测值稍高，与TTX进行竞争酶联免疫检测，其IC50值波动范围为10～20ng／ml。结论TTX—KLH具有更好的免疫原性。