shRNA干扰HERG钾通道治疗裸鼠皮下人成神经细胞移植瘤

摘要

目的:探讨发卡结构小片段RNA(small hairpin interfering RNA,shRNA)干扰人ERG(human ether-α-go-go-related gene,HERG)钾通道治疗裸鼠皮下人成神经细胞移植瘤的疗效和作用机制。方法:用真核转录载体mU6pro构建针对herg基因的发卡状RNA干扰质粒(shRNA-herg)。18只BALB/c裸小鼠皮下接种成神经细胞瘤SH-SY5Y细胞,建立裸鼠皮下人成神经细胞移植瘤模型,当瘤体积达到100mm3时随机分成3组,分别为生理盐水组(Ⅰ)、对照质粒组(Ⅱ)、干扰质粒组(Ⅲ)。各组瘤内分别注射生理盐水、对照质粒、干扰质粒,以后每7d注射1次,连续15d。观察各组肿瘤生长情况,RT-PCR测定肿瘤组织herg基因mRNA含量变化,免疫组化检测肿瘤组织中HERG钾通道蛋白变化。结果:经治疗后,第Ⅲ组肿瘤生长受到明显抑制,Ⅱ、Ⅲ组抑瘤率分别为3.04%和29.78%(P<0.05)。肿瘤组织内herg基因mRNA含量、HERG钾通道蛋白,Ⅲ组较Ⅰ、Ⅱ组表达减弱。结论:构建的shRNA干扰质粒可通过靶向性抑制herg基因及其编码的HERG钾通道蛋白的表达,有效地抑制人成神经细胞瘤的生长。