shRNA沉默survivin对鼻咽癌裸鼠移植瘤增殖与凋亡的影响

摘要

目的:观察pSIREN-survivin/shRNA是否能诱导鼻咽癌移植瘤细胞的凋亡并抑制移植瘤的生长及其抑瘤效果.方法:建立人鼻咽癌低分化细胞株CNE-2裸鼠移植瘤模型.成瘤后随机分为空白对照组A、阴性对照组B、实验组C,分别瘤内注射多点PBS、阴性质粒、阳性质粒pSIREN-survivin/shRNA.通过测量肿瘤体积计算抑瘤率,半定量RT-PCR及免疫组织化学检测移植瘤的survivin表达,透射电镜检测移植瘤的细胞凋亡情况,并采血检测裸鼠的肝肾功能.结果:转染重组质粒后实验组、阴性对照组抑瘤率分别为(52.11±1.03)％,(2.15±0.11)％,survivin mRNA的表达水平电泳相对量抑制率分别为(77.5±2.03)％、(1.39±0.14)％,差异具有统计学意义(P＜0.05).免疫组织化学显示实验组survivin染色较浅淡,强度小于空白及阴性对照组.透射电镜观察实验组出现核染色质加深、分裂成块、片状,并向核膜周围边集,胞质颜色加深,密度增加,亚细胞器线粒体等消失,细胞凋亡较早期的微观变化.同时裸鼠肝肾功能的差异无统计学意义.结论:转染pSIREN-survivin/shRNA后能明显抑制鼻咽癌移植瘤组织中survivin的表达,促进肿瘤细胞的凋亡,减缓肿瘤生长.可以肯定,基因干扰技术能有效沉默过表达的鼻咽癌survivin基因,抑制肿瘤的生长,对鼻咽癌是一种有良好前景的基因治疗方法.