Bacillus subtilis FS321的α-淀粉酶基因的克隆与表达

摘要

耐热α-淀粉酶被广泛用于食品等诸多行业,从中国北方高温堆肥分离的枯草芽孢杆菌FS321中克隆了一中度耐热α-淀粉酶基因,并实现在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达。通过PCR技术克隆Bacillus subtilis FS321的α-淀粉酶编码基因(BSA),该基因全长1980bp。并构建重组表达质粒pET-28a/BSA,转化大肠杆菌E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测到大小约为73.0kD的重组融合蛋白,可溶性淀粉平板检测结果表明BSA在大肠杆菌中实现了有效表达。该重组α-淀粉酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH7.5。