稻瘟菌诱导的稻叶脂氧合酶的纯化及部分氨基酸序列测定

摘要

作者对已报道的稻瘟菌诱导稻叶脂氧合酶ＣＭ－ＬＯＸ１和ＣＭ－ＬＯＸ２的纯化方法作了进一步改进和完善。改进后的纯化方法可缩短该脂氧合酶的纯化时间，并提高纯化倍数。利用改进的方法，作者从２０ｇ非亲和性稻瘟菌小种接种稻叶中获得了电泳纯的酶蛋白ＣＭ－ＬＯＸ１１３３μｇ和ＣＭ－ＬＯＸ２２０８μｇ。在此基础上，采用特异性的蛋白酶ｅｎｄｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅＬｙｓ－Ｃ和溴化氰对该酶蛋白进行了裂解，回收其肽段，得到了ＣＭ－ＬＯＸ１的３个不同肽段共３０个氨基酸和ＣＭ－ＬＯＸ２的７个不同肽段共８７个氨基酸的序列，为最终克隆这２个酶的基因奠定了基础。