抗肝癌细胞单链抗体的筛选和鉴定

摘要

以人正常肝细胞系HL-7702为阴性筛选细胞,肝癌细胞系HepG-2为阳性筛选细胞,从全人源噬菌体抗体库中筛选与HepG-2细胞系特异性结合的单链抗体。通过PCR及ELISA鉴定,将阳性克隆转入pET22b载体中构建表达质粒。所得的基因工程菌经测序,以IPTG诱导可溶性单链抗体表达,并通过SDS-PAGE、Westernblot和ELISA检测,最终得到能与HepG-2特异性结合的单链抗体。