中和抗肾小球基底膜抗体的单链抗体的筛选与鉴定

摘要

目的制备人抗肾小球基底膜（GBM）抗体的特异性人源化单链可变区抗体。方法采用噬菌体表面展示技术,获得一个与人抗GBM抗体结合活性较强的单链可变区抗体片段的阳性克隆,并对该克隆进行DNA序列测定分析。结果对噬菌体单链可变区抗体库经过3轮筛选后,与第1轮相比富集了137倍。噬菌体抗体与人抗GBM抗体的结合活性其中有35株克隆ELISA的吸光度较高。对这些噬菌体抗体进行交叉反应后,确定其中有10株交叉反应较弱。确定1株（C31）阳性克隆提取质粒,进行DNA序列测定,大小为750 bp,并符合人源化单链可变区抗体的序列结构。结论应用噬菌体展示技术成功获得人-抗GBM抗体的单链可变区抗体基因,为临床上治疗Goodpasture综合征奠定实验基础。