生精细胞的体外培养

摘要

目的:在体外培养中,观察精原细胞的增殖、分化和形态变化规律。方法:用胶原酶、透明质酸酶和胰蛋白酶分次消化法制取睾丸组织的细胞悬液,密度梯度离心法富集生精细胞,贴壁培养后观察生精细胞的存活、分裂和形态变化,并行AnnexinⅤ-FITC/PI染色,采用激光共聚焦扫描显微镜检测细胞的凋亡情况。结果:睾丸组织细胞悬液中的体细胞在培养中较早贴壁,胞质形成多个突起;精原细胞贴壁较迟,贴壁后呈规则的圆形或卵圆形,以链状或团块状位于体细胞层之上,细胞分裂不完全,相互间以细胞间桥相连。AnnexinⅤ-FITC/PI染色显示,培养第2天时精原细胞已出现凋亡,但数量极少,后逐渐增多。结论:在本实验所提供的体外培养条件下,精原细胞能够存活并发生贴壁、分裂、分化等行为,但同时也有细胞凋亡。