酪蛋白酶解产物β-酪啡肽-7的HPLC分析和阿片活性鉴定

摘要

利用建立的高效液相色谱(HPLC)定量分析法,在酪蛋白2 h酶解液中检测到134.27μg.mL-1的β-酪啡肽-7(β-CM-7);其酶解消化液经葡聚糖凝胶柱层析收集物3、4组中也检测到β-CM-7,含量分别为44.79和18.90μg.mL-1;而1和2组中未检测到。细胞生物学鉴定结果表明:酪蛋白酶解液、柱层析收集的3、4组均能抑制富含δ-阿片受体的神经杂交瘤细胞腺苷酸环化酶活性,降低细胞内cAM P水平,纳洛酮可逆转这种抑制作用,证明有阿片活性。1、2组和酪蛋白本身无阿片作用。HPLC测定结果与细胞生物学鉴定结果相符,证明所建立的HPLC方法可用于酪啡肽的定量分析。