脆性X智力低下基因的体外封闭

摘要

目的　初步建立一种FMR1基因的体外封闭方法 ,并初步探讨将其用于脆性X综合征研究的可能性 ;方法　利用NO可以诱导FMR1基因启动子区CpG岛甲基化的原理 ,将人类新鲜的外周血单个核细胞在含有 5 0 0 μmol/L硝普钠及2 0 %新生牛血清的RPMI 16 4 0培养基中培养 ,诱导FMR1基因启动子区CpG岛甲基化 ,从而使FMR1基因封闭 ,通过逆转录PCR ,检测FMR1基因的表达 ;结果　培养后第 12h、2 4h、4 8h均未检测到FMR1基因的表达 ,第 72h以后 ,重新表达 ,若于培养满 4 8h及时更换培养液 ,则培养第 72h亦未见表达 ;结论　本方法可在体外有效地封闭人类外周血单个核细胞的FMR1基因 ,模拟了脆性X综合征患者细胞的基因特点 。