多重分子信标环介导等温扩增快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

摘要

目的建立多重分子信标环介导的等温扩增快速检测葡萄球菌耐药基因mecA和种特异性基因femA的方法。方法利用包被有SPA单克隆抗体的磁珠富集样品中的金黄色葡萄球菌,快速提取其DNA,用多重环介导等温扩增反应(LAMP)同时扩增金黄色葡萄球菌耐药基因mecA和femA,扩增条件为65℃保温1 h;在反应过程中,两种分子信标荧光探针分别与mecA和femA基因的扩增产物互补序列结合,探针上的FAM和TET荧光分子产生两种荧光,最后检测反应管中的两种荧光值。结果该方法的最低检测限为10CFU/ml,与M-H培养基苯唑西林药敏试验结果相比较,灵敏度99.0%,特异度90.9%。结论该方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便快速,适用于直接快速基因检测临床样品中MRSA。