阳离子交换层析法分离鸡蛋过敏原卵类粘蛋白

摘要

目的建立一种简单的色谱方法以获得保持免疫活性的高纯度卵类粘蛋白。方法将鸡蛋清中的卵粘蛋白等杂蛋白沉淀及pH调节的预处理,处理后蛋清液上样到CM-Sepharose Fast Flow交换层析柱上,然后收集目的蛋白浓缩,通过比较冷冻干燥后分离的卵类粘蛋白的重量与其在全蛋清中的比例来计算其得率,利用电泳分析卵类粘蛋白纯度,采用酶联免疫法(ELISA)检测卵类粘蛋白免疫活性。结果此方法纯化卵类粘蛋白时间短(少于2 h),卵类粘蛋白得率为45.8%,纯度为94.1%。此外,通过该方法纯化的卵类粘蛋白显示出与标准品相似的免疫活性。结论该分离方法操作简单、成本低廉并且能保持卵类粘蛋白的免疫活性,可用于卵类粘蛋白的致敏性研究。