流式细胞术检测磷酸化STAT3

摘要

为建立流式细胞术检测细胞内的信号转导及转录活化因子 3 （STAT3 ）的方法 ,用IL 5刺激HL 60细胞株 ,活化细胞内的STAT3 ,然后用抗酪氨酸磷酸化STAT3抗体及相应的二抗标记 ,进行流式分析。结果表明 :（ 1）IL 5能活化HL 60细胞内的STAT3 ,且STAT3的酪氨酸磷酸化水平与IL 5的浓度之间存在剂量依赖关系 ;（ 2 ）可用流式细胞术测得的平均荧光强度反映细胞内酪氨酸磷酸化STAT3的相对浓度。应用流式细胞术能快速、定量地测定细胞内的磷酸化STAT3水平。本法可用于STAT3相关疾病的筛选和临床监测及对其他胞内信号转导分子的研究。