FOXQ1介导TGF-β1信号通路调控胰腺癌PANC-1细胞体外血管生成

摘要

目的:探讨沉默叉头框蛋白Q1（forkhead box Q1,FOXQ1）基因对胰腺癌PANC-1细胞体外血管生成的影响及其在转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）信号通路中的作用。方法:用FOXQ1-sh RNA重组慢病毒和阴性对照慢病毒（NC-sh RNA）感染PANC-1细胞,流式细胞术检测感染率,实时荧光定量PCR（q PCR）和Western blotting法检测沉默效果。实验设FOXQ1-sh RNA组、NC-sh RNA组与空白对照组,用人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）进行体外血管生成实验,荧光显微镜下观察细胞血管生成能力。用q PCR、Western blotting法检测VEGF-A、MMP-2 m RNA和蛋白的表达水平;用TGF-β1（终质量浓度5 ng/ml）诱导FOXQ1-sh RNA组和NC-sh RNA组细胞,检测诱导前后细胞体外血管生成能力变化与FOXQ1、VEGF-A、MMP-2表达差异。结果:sh RNA慢病毒感染率为90%左右,FOXQ1-sh RNA组PANC-1细胞的体外血管生成数目显著少于NC-sh RNA组[（9.33±2.08）vs（28.67±2.52）条,P＜0.05],其VEGF-A、MMP-2表达下调（均P＜0.05）。TGF-β1增强各组细胞体外血管生成能力,促进FOXQ1、VEGF-A、MMP-2 m RNA和蛋白的表达水平（均P＜0.05）。结论:FOXQ1介导了胰腺癌PANC-1细胞体外血管生成,其机制可能与VEGF-A和MMP-2的下调有关,且可能受TGF-β1通路的调控。